Nitro grubu İçeren Bazı Maddelerin Glutatyon Redüktaz Enzimi Üzerindeki İnhibisyon Etkisinin İncelenmesi

Abstract

Glutatyon redüktaz (Glutatyon: NADP+ oksidoredüktaz, EC 1.8.1.7; GR) düşük (GSH) veya yüksek molekül ağırlıklı (GSSG) disülfit substratları ile indirgenmiş piridin nükleotidleri (NADPH) arasında elekton transferini katalizler. GR inhibitörleri son zamanlarda anti-sıtma ve kansere karşı faaliyetlerinin keşfedilmesi nedeniyle oldukça popüler hale gelmiştir. Enzimatik aktivite ölçümü Beutler metodu ve spektrofotometre kullanılarak 25°C’de yapıldı. Ölçüm sistemi 100 mM Tris-HCl tamponunda (pH 8;0), 0,5 mM EDTA, 3,3 mM GSSG ve 0,1 mM NADPH içeriyordu. Nitrobenzen (1), 3,5-dinitrosalisilik asit (2), (2,4-dinitrofenil) ((4-(prop-1-en-2-yl) sikloheks-1- enil)-metil) sulfan (3), ((7,7-dimetilbisiklo [2.2.1] heptan-1-il)metil)-(2,4-dinitrofenil)sulfan (4) ve ((2- kloro-7,7-dimetilbisiklo [2.2.1] heptan-1-il)metil)- (2,4-dinitrofenil)sulfan (5) maddelerinin GR enzimi üzerindeki in vitro inhibisyon etkisi incelendi. İnhibisyon etkisi gösteren maddeler için % aktivite- [I] grafikleri çizilerek IC50 değerleri bulunmuştur. Bu maddelerin GR için IC50 değerlerinin mikromolar seviyesinde olduğu gözlemlendi.

Glutathione reductase (Glutathione: NADP+ oxidoreductase, EC 1.8.1.7; GR) catalyzes electron transfer between reduced (GSH) or high molecular weight (GSSG) disulfide substrates and reduced pyridine nucleotides (NADPH). Discovery of glutathione reductase (GR) inhibitors has become very popular recently due to antimalarial and anticancer activities. Enzymatic activity was measured by Beutler’s method with a Spectrophotometer, at 25°C. The assay system contained 100 mM Tris-HCl buffer pH 8.0, including 0.5 mM EDTA, 3.3 mM GSSG and 0.1 mM NADPH. Inhibition effects of Nitrobenzene (1), 3,5- Dinitrosalicylic acid (2), (2,4-Dinitrophenyl)((4-(prop1-en-2-yl)cyclohex-1-enyl)-methyl)sulfane (3), ((7,7- dimethylbicyclo[2.2.1]heptan-1-yl)methyl)-(2,4- dinitrophenyl)sulfane (4), and ((2-Chloro-7,7- dimethylbicyclo[2.2.1]heptan-1-yl)methyl)-(2,4- dinitrophenyl)sulfane (5) compounds on GR have been investigated in vitro. IC50 values were determined by drawing % activity- [I] graphs for compounds showing inhibition effects. IC50 values of GR for these substances were observed to be at micromolar level.